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Id: 8698 Autor: Rivera, Paola; Ticlla, Mónica; Balda, Lourdes; Gonzalez, Dana; Céspedes, Manuel. Título: Diversidad genética de aislamientos peruanos de Leptospira spp. mediante electroforesis en gel de campo pulsado^ies / Genetic diversity of Peruvian isolates of Leptospira spp. through pulsed field gel electrophoresis Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;29(4):469-476, oct.- dic. 2012. . Resumen: Objetivos. Determinar la diversidad genética de aislamientos peruanos de Leptospira spp. mediante electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE). Materiales y métodos. Se estandarizó la metodología de PFGE propuesta por Galloway y Levett (2008). Se elaboró una base de datos con los perfiles de PFGE de 65 cepas de referencia y se aplicó la técnica en 111 aislamientos de Leptospira spp. obtenidos en Perú entre 2002 y 2010. Resultados. Se determinó gran diversidad genética de serovares de Leptospira spp. circulantes en nuestro país. Se identificaron 57 serovares, 47 en 97 aislamientos patógenos. Los serovares más frecuentes fueron Icterohaemorrhagiae/Copenhageni (n=24) y Canicola (n=7). Las especies más frecuentes fueron L. santarosai (49,5 por ciento) y L. interrogans (37,1 por ciento). La distribución de especies, clusters y serovares varió según la fuente del aislamiento, el contexto ambiental y la procedencia. Conclusiones. Existe gran diversidad de serovares circulantes en el Perú, la cual está relacionada a la especie, el reservorio, el contexto ambiental y la procedencia del aislamiento. Se evidencia las relaciones genéticas y epidemiológicas entre aislamientos de diferentes fuentes, lo cual está relacionada a la especie, el reservorio, el contexto ambiental y la procedencia del aislamiento. (AU)^iesObjectives. Determine the genetic diversity of Peruvian isolations of Leptospira spp. through Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). Materials and methods. The PFGE methodology proposed by Galloway and Levett (2008) was standardized. A database including the PFGE profiles of 65 reference strains was prepared, and the technique was applied in 111 isolates of Leptospira spp. obtained in Peru between 2002 and 2010. Results. A great generic diversity of serovars of circulating Leptospira spp. was determined in our country. 57 serovars were identified, 47 out of 97 pathogen isolates. Most frequent serovars were Icterohaemorrhagiae/Copenhageni (n=24) and Canicola (n=7). The most frequent species were L. santarosai (49,5 percent) and L. interrogans (37,1 percent). The distribution of species, clusters and serovars changed according to the source of isolate, the environmental context and the origin. Conclusions. There is great diversity of circulating serovars in Peru. There are genetic and epidemiological relations among isolates of different sources, and this is related to species, reservoir, environmental context and the origin of the isolate. (AU)^ien. Descriptores: Leptospira Electroforesis en Gel de Campo Pulsado Variación (Genética) - Perú Medio Electrónico: http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/artrevista/pdf/rpmesp2012.v29.n4.a8.pdf / es

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Id: 8107 Autor: Moreno, Natali; Agudelo-Flórez, Piedad. Título: Aplicación de las pruebas de PCR convencional simple y múltiple para la identificación de aislamientos de Leptospira spp. en Colombia^ies / Application of conventional and multiplex PCR assays for identification of isolates of Leptospira spp. in Colombia Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;27(4):548-556, dic. 2010. ^bilus, ^btab. Resumen: Debido a las dificultadas asociadas con la identificación serológica de aislamientos de Leptospira ssp, se genera gran interés en la pruebas moleculares por su poder discriminatorio, reproducibilidad y fßcil interpretación. Objetivo. Aplicar y validar la prueba de PCR convencional, usando dos pares de iniciadores descritos previamente y dirigidos a los genes lipL32 (PCR simple) y secY/flaB (PCR múltiple), con el fin de evaluar su aplicación para identificar especies patógenas y saprófitas de Leptospira spp. Materiales y métodos. Para la estandarización de las pruebas de PCR se usó 22 cepas de referencia internacional y 12 aislamientos colombianos. Se determinó el nivel de detección de cada pareja de iniciadores, su especificidad frente a otros microorganismos causantes de enfermedades endémicas en Colombia y su capacidad de identificar especies dentro del grupo de Leptospira. Resultados. El límite de detección de la PCR simple lipL32 fue una dilución 1:10000 y para la PCR múltiple secY/flaB fue una dilución 1:100 para el gen secY y 1:1000 para flaB. La especificidad de todos los iniciadores fue de 100 por ciento. La PCR simple lipL32, mostró amplificado específico para 21/22 cepas de referencia mientras que la PCR multiple secY/flaB lo fue para 18/22 cepas. De los 12 aislamientos colombianos, siete fueron positivos por PCR lipL32 y seis lo fueron por PCR secY/flaB. Conclusiones. Los resultados mßs consistentes fueron obtenidos con la PCR simple lipL32 tanto en límite de detección, especificidad y utilidad para la identificación de Leptospira spp, por lo que esta prueba es aplicable a la identificación molecular de aislamientos patógenos de Leptospira spp de diversas fuentes.(AU)^iesSerological identification of Leptospira ssp isolates is difficult to achieve. Thus, molecular testing may be of great interest thanks to its high discrimination power, reproducibility and easy interpretation. Objective. To implement and validate conventional and multiplex PCR methods (using primers directed against lipl32 and secY/flaB genes, respectively). To assess the capacity of PCR methods to identify pathogenic and saprophytic species of Leptospira ssp. Material and methods. 22 international reference strains and 12 colombian isolates were used. DNA was extracted with a commercial kit (Wizard). Specificity and sensitivity of both PCR methods were evaluated. Results. The maximum dilution of DNA samples allowing the detection of Leptospira ssp was determined to be 1:10000 for the PCR lipL32 and 1:100/1:1000 for the multiplex PCR secY/flaB. Both PCR didn't detect DNA from microorganisms unrelated to Leptospira ssp. The lipL32 PCR specifically amplified a 423bp fragment from all pathogenic Leptospira reference strains, while the secY/flaB PCR amplified both 285bp (secY) and 793bp (flaB) fragments from 18 reference strains. The lipL32 PCR detected 7/12 colombian isolates, while secY/flaB PCR detected both secY and flaB genes from 6/12 isolates. Conclusions. Best results were obtained with the lipL32 PCR, which displayed a better sensitivity and a better capacity to detect different strains than the multiplex PCR. The secY primers showed a poor specificity to pathogenic species and a poor sensitivity. Thus, lipL32 primers show high potential for molecular diagnosis of Leptospira spp in clinical and environmental samples.(AU)^ien. Descriptores: Leptospira Reacción en Cadena de la Polimerasa Técnicas de Diagnóstico Molecular - Colombia Medio Electrónico: http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/artrevista/pdf/rpmesp2010.v27.n4.a9.pdf / es Localización: PE14.1

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Id: 4850 Autor: Céspedes Z, Manuel; Tapia L, Rafael; Balda J, Lourdes; Gonzalez Q, Dana; Peralta, Carlos; Condori, Patricia. Título: Estandarización y validación de una prueba de PCR para el diagnóstico precoz de leptospirosis humana^ies / standardization and validation of the polymerase chain reaction for early diagnosis of human leptospirosis Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;24(1):20-26, ene.-mar. 2007. ^bilus, ^btab. Resumen: Objetivos: Estandarizar y optimizar la prueba de PCR dirigida al gen rrs (16S) de Leptospira spp., para luego validarsu uso en muestras de pacientes con síndrome febril captados en zonas endémicas del Perú. Material y métodos: Seestandarizó y validó una prueba de PCR para el diagnostico rápido de leptospirosis en muestras de sangre y orina. Seoptimizó la prueba con muestras de ADN de Leptospira de diferentes especies, y se determinó en 180 muestras clínicasde pacientes con sospecha de leptospirosis su sensibilidad y especificidad en comparación con la prueba de aglutinaciónmicroscópica (MAT) y ELISA IgM. Resultados: El PCR estandarizado amplificó el ADN de 25 serovares de seis especiesde Leptospira spp. No amplificó las muestras de ADN de otros microorganismos patógenos. La sensibilidad y especificidaddel método fue 100% in vitro. Su sensibilidad fue de 100% (IC95: 97,9 - 100%) en muestras de sangre antes de los ochoprimeros días de enfermedad y de 30% (IC95: 16,3 - 43-,7) cuando el tiempo de enfermedad fue mayor. El PCR en orinatiene una baja sensibilidad. Conclusiones: El PCR estandarizado es más sensible que las pruebas serológicas en losprimeros días de enfermedad y es poco sensible cuando la carga bacteriana es baja en sangre^ies. Descriptores: Leptospira Leptospirosis Anticuerpos Reacción en Cadena de la Polimerasa Diagnóstico Precoz Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/Rev/MED_EXP/sp2007/a04v24n1.pdf / es Localización: PE14.1; Rev. peru. med. exp. salud publica; 24 (1):20-26

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Id: 4691 Autor: Herrer, Arístides; Battistini, Germán; Liceras, Julia. Título: Presencia de la leptospira bataviae en el Perú / Presence of leptospira bataviae in Peru Descriptores: LEPTOSPIRA PERU Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1957/a02v11n1-2.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. med. exp.;11(1-2):29-33, dic. 1957

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Id: 4635 Autor: Ayulo R., Victor; Dammert T., Olga. Título: Incidencia de la infestación con leptospira icterohaemorrhagiae en las ratas grises (mus norvegicus) de la ciudad de Lima / Incidence of infestion with letospira icterohaemorrhagias in grey rats (mus norvegicus) in Lima city Descriptores: LEPTOSPIRA INTERROGANS RATAS PERU Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp1947/a03v6n1-4.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. med. exp.;6(1-4):94-107, dic. 1947

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Id: 4457 Autor: Céspedes Z., Manuel; Glenny A., Martha; Vidal Felices, A.; Balda J., Lourdes; Suárez M., Victor. Título: Prueba de Elisa indirecta para la detección de anticuerpos IgM para el diagnóstico de leptospirosis humana / Indirect ELISA test for the detection of of IgM antibodies in the diagnosis of human leptospirosis Resumen: Para el diagnóstico temprano de enfermedades con cuadro clínico inespecífico como la leptospirosis, es necesario la confirmación laboratorial mediante pruebas específicas, con la finalidad de que el diagnóstico sea más acertado y rápido. Objetivo: Se realizó un estudio comparativo entre la microaglutinación (MAT) y la prueba de ELISA indirecta estandarizada con un "pool" de antígenos de Leptospira interrogants, para la detección de anticuerpos IgM, en muestras de suero de fase aguda del leptospirosis humana. Materiales y métodos: 40 muestras de pacientes con sospecha clínica y con títulos de 1:100-1:12800 por la prueba de MAT, 80 muestras negativas de pacientes aparentemente sanos con enfermedades como Brucelosis, Sifilis, Tifus murino, Hepatitis B, Fiebre Amarilla, Dengue y Enfermedad de Carrión fueron evaluadas por ELISA IgM. Resultados: Se obtuvo una sensibilidad de 97,5 por ciento y especificidad de 98, 75 por ciento, no observándose reacción cruzada con otras enfermedades. Conclusión: ELISA IgM validado en el laboratorio es suficiente sensible, específico y de fácil aplicación para el uso como prueba de aterrizaje en una infección por Leptospiras con la subsecuente confirmación por MAT. Descriptores: TEST DE ELISA TEST DE AGLUTINACION LEPTOSPIROSIS LEPTOSPIRA INTERROGANS Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a04v19n1.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud pública;19(1):24-27, ene.-mar. 2002

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Id: 4118 Autor: Céspedes Z, Manuel; Fernández C, Rosa; Rimarachín D, Rocío; Taipe S, Haydee; Cenepo T, Juan; Mori y Gonzales, María; Torres T, Isela; Castillo C, Celso; Balda J, Lourdes; Tapia L, Rafael; Gonzalez Q, Dana; Glenny A, Martha. Título: Leptospirosis: una enfermedad zoonótica hiperendémica en la provincia de Coronel PortilloUcayali, Perú / Leptospirosis a zoonotic Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;21(2):62-70, abr.-jun. 2004. ilus, tab. Resumen: Objetivo: Determinar la prevalencia de anticuerpos para leptospiras en personas asintomáticas en las localidadesdedicadas al comercio y la agricultura de la provincia de Coronel Portillo, del departamento de Ucayali. Asimismo determinar la prevalencia de leptospirosis en animales domésticos. Material y Métodos: En este estudio transversal analítico, se tomó muestras de suero de 364 pobladores de 4 localidades, en quienes se evaluó la presencia de anticuerpos totales contra leptospiras en suero por el método de ELISA y la prueba de microaglutinación (MAT). Se realizó el análisis estadístico para ver el grado de asociación entre las características generales de la población y la información recopilada en la encuesta con la positividad para anticuerpos para leptospiras. De la misma manera, setomó muestras de suero de 374 animales domésticos(canes) a los que se realizó MAT. Resultados: Se enrolaron 364 personas de las cuales 227 (62,4 por ciento) fueron mujeres y 137 (37,6 por ciento) varones, 114 (31,3 por ciento) pobladores tuvieron anticuerpos contra leptospiras y los serovares más frecuentes fueron Bratislava y Georgia según MAT, los probablesfactores asociados a la positividad a anticuerpos para leptospiras en los pobladores fueron: guardar alimentosen el hogar (OR=2,221), ser agricultor (OR=3,418), ser obrero y agricultor (OR=2,088), eliminar basura en el campo (OR=2,348). En canes, 181 (52,2 por ciento) tuvieron serología positiva a leptospiras. Conclusiones: Existe una alta prevalencia de serología positiva para leptospiras en población general asintomática y condiciones favorables para la presencia de leptospiras en las localidades estudiadas. En estas zonas se recomienda realizar actividades educativas preventivas frecuentes, tomando en cuenta los resultados de este estudio. Descriptores: Leptospira Leptospirosis Anticuerpos Factores de riesgo Prevalencia Perú Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2004/a02v21n02.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;21(2):62-70, abr.-jun. 2004

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Id: 4011 Autor: Macedo A, Sonia. Título: Estudio ultraestructural de Leptospira biflexa serovar Andamana cepa JNS al microscopio electrónico de transmisión y barrido / Ultrastructural study of Leptospira biflexa serovar Andamana, strain JNS using transmission and scanning electron microscope Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;22(4):281-9, oct--dic. 2005. ilus. Resumen: Objetivos: Investigar la ultraestructura de Leptospira biflexa serovar Andamana cepa JNS, por la técnica de réplica metálica, cortes ultrafinos y tinción negativa al microscopio electrónico de transmisión (MET) y barrido (MEB) en alta y ultraalta resolución. Materiales y métodos: Cultivos en fase logarítmica 12-15x106 cel/mL del serovar Andamana cepa JNS, aislada de un paciente. Se aplicaron los métodos de tinción negativa, cortes ultrafinos y réplica metálica para la microscopía electrónica de transmisión. Para la microscopía electrónica de barrido se usaron las técnicas enalta y ultraalta resolución de muestras cubiertas con oro y platino. Resultados: Con el método de réplica metálica se definió la estructura externa en células individuales de Leptospira biflexa serovar Andamana al MET. Mediante la técnica de tinción negativa se observó la membrana externa formada por tres capas, los filamentos axiales, la membrana citoplasmática, el citoplasma granular con inclusiones electronodensas, las formaciones ½globosas», la ½estructura terminal», ½apéndices terminales», además de las inclusiones permeables para los electrones, claramentedefinidas. La morfología clásica del microorganismo fue observada en cortes finos, y al microscopio electrónicode barrido. Conclusiones: Se reporta por primera vez la técnica de réplica metálica para determinar la morfologíaexterna en células individuales de Leptospira biflexa serovar Andamana JNS, la cual ofrece resultados ventajosos en comparación con otros métodos. La ultraestructura, y las inclusiones permeables para electrones dentro del citoplasma a una magnificación de 120000x 20KV fueron nítidamente observadas por tinción negativa. La estructura helicoidal del microorganismo se comprobó al MEB. Descriptores: Transmisión por Microscopía Electrónica Microscopía Electrónica de Transmisión de Rastreo Leptospira Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2005/a07v22n4.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica; 22(4): 281-289, oct.-dic. 2005

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