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Id: 8580 Autor: Moreno Exebio, Luis; Grande Ortiz, Miguel Angel. Título: Validación de un método de cromatografía líquida para la determinación de rifampicina en plasma humano^ies / Validation of a liquid chromatography method for rifampicin determination in human plasma Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;31(1):56-61, ene.- mar. 2014. ^bilus, ^btab, ^bgraf. Resumen: Objetivos: Validar un método de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para la determinación de rifampicina (RFP) en plasma humano. Materiales y métodos. Se desarrolló un método HPLC para la determinación de RFP en plasma. La separación fue realizada por cromatografía de fase reversa con una columna C18 y una fase móvil compuesta por una mezcla de acetonitrilo y solución amortiguadora de fosfato de potasio monobásico 0,05 M (38:62 v/v) a 335 nm. En el cual se empleó como estándar interno rifampicina quinona (RFP-QN). Resultados. Los tiempos de retención de RFP y RFP-QN fueron 7,81 y 12,26 minutos, respectivamente. El ensayo fue lineal de 0,5 a 250 ug/mL Los parámetros evaluados de precisión, exactitud, selectividad, linealidad, recuperación cumplieron con lo establecido en las guías internacionales de validación de métodos bioanalíticos. Conclusiones. El método HPLC desarrollado es simple, específico, sensible, selectivo y lineal para un amplio rango de concentraciones de RFP en plasma. (AU)^iesObjectives: To validate the high-performance liquid chromatography method (HPLC) for rifampicin (RFP) determination in human plasma. Materials and methods. A HPLC method for RFP determination in plasma was developed. The separation was performed by reversed-phase chromatography with C18 column and a mobile phase composed of a mixture of acetonitrile and monobasic potassium phosphate buffer solution 0.05 M (38:62 v/v) at 335 nm in which standard rifampicin quinone (RFP-QN) was used. Results. The retention times of RFP and RFP-QN were 7.81 and 12.26 minutes, respectively. The trial was linear from 0.5 to 250 ug/mL. The evaluated parameters of precision, accuracy, selectivity, linearity, and recovery complied with the established international standards for validation of bioanalytical methods. Conclusions. The developed HPLC method is simple, specific, sensitive, selective and linear for a wide range of RFP concentrations in plasma. (AU)^ien. Descriptores: Cromatografía Líquida de Alta Presión Estudios de Validación como Asunto Rifampin Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/8/8 / es Localización: PE14.1

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Id: 8466 Autor: Mendoza Ticona, Carlos Alberto; Moore, David AJ; Alarcón Guizado, Valentina Antonieta; Samalvides Cuba, Frine; Seas Ramos, Carlos Rafael. Título: Propuesta de esquemas de tratamiento antituberculosis basados en la susceptibilidad a isoniacida y rifampicina^ies / Proposal of anti-tuberculosis regimens based on susceptibility to isoniazid and rifampicin Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;30(2):197-204, abr.- jun. 2013. ^btab. Resumen: Objetivo. Elaborar esquemas de tratamiento para tuberculosis de acuerdo con sus perfiles de susceptibilidad a isoniacida (H) y rifampicina (R). Materiales y métodos. Un total de 12 311 aislamientos de M. tuberculosis (Instituto Nacional de Salud, 2007-2009) se clasificaron en cuatro grupos de acuerdo con su susceptibilidad a H y R. En cada grupo se analizó la sensibilidad a etambutol (E), pirazinamida (Z), estreptomicina (S), kanamicina (Km), capreomicina (Cm), ciprofloxacina (Cfx), etionamida (Eto), cicloserina (Cs) y ácido p-amino salicílico (PAS). En base a los perfiles de resistencia, principios de terapéutica de la Organización Mundial de la Salud y costos en el país, se elaboraron los esquemas más adecuados para cada grupo. Se definió la eficacia potencial (EP) como la proporción de cepas sensibles a tres o cuatro drogas del esquema evaluado. Resultados. Los esquemas con el menor costo y la mayor EP a tres y cuatro drogas para tuberculosis sensible a H y R fueron: HRZ (EP=99,5%), HREZ (EP=99,1%); REZCfx (EP=98,9%) y para tuberculosis resistente a H: REZCfxKm (EP=97,7%). Para tuberculosis resistente a R: HEZCfx (EP=96,8%) y HEZCfxKm (EP=95,4%); el esquema con mejor eficacia potencial para tuberculosis multidrogorresistente fue EZCfxKmEtoCs (EP=82,9%). Conclusión. Basados en la resistencia a H y R se han elaborado y seleccionado esquemas de tratamiento con la más alta probabilidad de eficacia. Esta propuesta es una alternativa viable para hacer frente a la tuberculosis en Perú donde el acceso a pruebas de sensibilidad rápida a H y R se viene expandiendo. (AU)^iesObjective: To elaborate optimal anti-tuberculosis regimens following drug susceptibility testing (DST) to isoniazid (H) and rifampicin (R). Design: 12 311 M. tuberculosis strains (National Health Institute of Peru 2007-2009) were classified in four groups according H and R resistance. In each group the sensitivity to ethambutol (E), pirazinamide (Z), streptomycin (S), kanamycin (Km), capreomycin (Cm), ciprofloxacin (Cfx), ethionamide (Eto), cicloserine (Cs) and p-amino salicilic acid (PAS) was determined. Based on resistance profiles, domestic costs, and following WHO guidelines, we elaborated and selected optimal putative regimens for each group. The potential efficacy (PE) variable was defined as the proportion of strains sensitive to at least three or four drugs for each regimen evaluated. Results: Selected regimes with the lowest cost, and highest PE of containing 3 and 4 effective drugs for TB sensitive to H and R were: HRZ (99,5%) and HREZ (99,1%), respectively; RZECfx (PE=98,9%) and RZECfxKm (PE=97,7%) for TB resistant to H; HZECfx (96,8%) and HZECfxKm (95,4%) for TB resistant to R; and EZCfxKmEtoCs (82.9%) for MDR-TB. Conclusion: Based on resistance to H and R it was possible to select anti-tuberculosis regimens with high probability of success. This proposal is a feasible alternative to tackle tuberculosis in Peru where the access to rapid DST to H and R is improving progressively. (AU)^ien. Descriptores: Tuberculosis/terapia Pruebas Diagnósticas de Rutina Isoniacida Rifampin - Perú  Estudios Transversales Límites: Humanos Masculino Femenino Adolescente Adulto Medio Electrónico: http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/artrevista/pdf/rpmesp2013.v30.n2.a6.pdf / es Localización: PE14.1

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Id: 8363 Autor: Asencios Solís, Luis; Quispe Torres, Neyda; Vásquez Campos, Lucy Título: Procedimientos para el control de calodad externo de la prueba rápida MODS (Microscopic Observation Direct Susceptibility) de sensibilidad a los fármacos antituberculosos^ies Procedures for controlling external calodad quick test MODS (Microscopic Observation Direct Susceptibility) of antituberculosis drug sensitivity- Fuente: Lima; Perú. Ministerio de Salud; 2012. 30 p. ^btab. Descriptores: Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos Control de Calidad Tuberculosis Pruebas de Sensibilidad Microbiana Isoniacida Rifampin - Perú Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/cindoc/pub_ins/2012/8242.pdf / es Localización: PE14.1, INS-178

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Id: 8362 Autor: Asencios Solís, Luis; Quispe Torres, Neyda; Vásquez Campos, Lucy Título: Manual de control de calidad externo de las pruebas de susceptibilidad a medicamentos antituberculosos: método de las proporciones^ies Manual external quality control of susceptibility testing TB drugs: proportion method- Fuente: Lima; Perú. Ministerio de Salud; 2012. 23 p. ^btab. Descriptores: Control de Calidad Agentes Antituberculosos Isoniacida Rifampin - Perú Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/cindoc/pub_ins/2012/8241.pdf / es Localización: PE14.1, INS-182

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Id: 8361 Autor: Asencios Solís, Luis; Quispe Torres, Neyda; Vásquez Campos, Lucy Título: Manual de procedimientos para la evaluación externa de la calidad de la prueba rápida de susceptibilidad a isoniacida y rifampicina, método GRIESS^ies Manual of procedures for external quality assessment of rapid testing of susceptibility to isoniazid and rifampicin, GRIESS method- Fuente: Lima; Perú. Ministerio de Salud; 2012. 20 p. ^btab. Descriptores: Control de Calidad Nitrato-Reductasa Tuberculosis Isoniacida Rifampin - Perú Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/cindoc/pub_ins/2012/8240.pdf / es Localización: PE14.1, INS-181

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Id: 8359 Autor: Asencios Solís, Luis; Sloutsky, Alexander; Stowell, Marcia Título: Método de nitrato-reductasa (GRIESS) para la detección rápida de la susceptibilidad a isoniacida y rifampicina^ies Method of nitrate reductase (GRIESS) for rapid detection of susceptibility to isoniazid and rifampicin- Fuente: Lima; Perú. Ministerio de Salud; 2012. 36 p. ^btab. Resumen: Este manual ha sido desarrollado en el marco del Proyecto “Haciendo la diferencia: consolidando una respuesta amplia e integral contra la Tuberculosis en el Perú” Octava Ronda Fondo Mundial - Componente Tuberculosis bajo los términos de donación (Acuerdo de Subvención PER-809- G07-T suscrito entre el Ministerio de Salud y el Fondo Mundial - Receptor Principal PARSALUD II) Primera Fase. Un método rápido para determinar la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida que satisfaga estos criterios es el método colorimétrico de la nitrato reductasa conocido como el método de Griess2, como una prueba barata que puede ser empleada en áreas de limitados recursos y de capacidad técnica no sofisticada, al estar basados exclusivamente en métodos convencionales y con materiales accesibles a cualquier laboratorio, tal como se describe en el presente manual^ies. Descriptores: Nitrato-Reductasa Isoniacida Rifampin Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos - Perú Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/cindoc/pub_ins/2012/8223.pdf / es Localización: PE14.1, INS-177

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Id: 8358 Autor: Asencios Solis, Luis; Acurio Usca, Margoth; Quispe Torres, Neyda; Vasquez Campos, Lucy Título: Susceptibilidad a drogas de Mycobacterium tuberculosis mediante observación microscópica (MODS) Drug susceptibility of Mycobacterium tuberculosis by microscopic observation (MODS)- Fuente: Lima; Perú. Ministerio de Salud; 2012. 41 p. ^btab, ^bilus, ^bgraf. Resumen: Este manual ha sido desarrollado en el marco del Proyecto “Haciendo la diferencia: consolidando una respuesta amplia e integral contra la Tuberculosis en el Perú” Octava Ronda Fondo Mundial - Componente Tuberculosis bajo los términos de donación (Acuerdo de Subvención PER-809- G07-T suscrito entre el Ministerio de Salud y el Fondo Mundial - Receptor Principal PARSALUD II) Primera Fase. El método de MODS (Microscopic Observation Drug Susceptibility assay) se basa en un cultivo directo de muestras de esputo en medio líquido, que detecta Mycobacterium tuberculosis y evalúa la susceptibilidad frente a isoniacida y rifampicina directamente de dichas muestras. El método se basa en que el crecimiento bacteriano en forma de cordones se visualiza tempranamente en medio líquido a través de un microscopio de luz invertida^ies. Descriptores: Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos Observación/métodos Isoniacida Rifampin Mycobacterium tuberculosis - Perú Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/cindoc/pub_ins/2012/8224.pdf / es Localización: PE14.1, INS-176

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Id: 8336 Autor: Karahan, Z. C; Akar, N Título: Restriction endonuclease analysis as a solution for determining rifampin resistance mutations by automated DNA sequencing in heteroresistant Mycobacterium tuberculosis strains^ien ..- Fuente: Larchmont; Mary Ann Liebert; 2005. 137-40 p. ^bgraf, ^bilus. Resumen: Rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis is mainly due to a small number of mutations in the rpoB gene coding for the beta subunit of RNA polymerase. Heteroresistance, which is defined as a mixture of wildtype and resistant subpopulations in the same culture, can influence the sensitivity of molecular tests for determining drug resistance by leading to false negative or indeterminable results. In our laboratory, we identified one heteroresistant strain during sequencing of the rpoB gene mutations, which are responsible for Rifampin resistance in M. tuberculosis. The sequence analysis of this isolate demonstrated the mixture of different strains, and the exact nature of the mutation could not be determined. In order to solve this problem, the possible mutation site was digested with Tsp509I restriction endonuclease, which made us separate the different strains. Sequencing of the separated mutated product revealed the mutation responsible for Rifampin resistance. From this result, we propose that, when the suggested mutation site creates and/or deletes a restriction endonuclease recognition site in heteroresistant populations, restriction endonuclease analysis can be used to ease the determination of resistance mutations by sequencing. (AU)^ien. Descriptores: Rifampin Tuberculosis Mycobacterium tuberculosis Resistencia a Medicamentos Límites: Humanos Localización: PE14.1

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Id: 8264 Autor: Asencios, Luis; Galarza, Marco; Quispe, Neyda; Vásquez, Lucy; Leo, Elena; Valencia, Eddy; Ramírez, Juan; Acurio, Margoth; Salazar, Rosario; Mendoza-Ticona, Alberto; Cáceres, Omar. Título: Prueba molecular genotype MTBDRplus, una alternativa para la detección rápida de tuberculosis multidrogorresistente^ies / Molecular test genotype MTBDRplus, an alternative to rapid detection of multidrug resistance tuberculosis Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;29(1):92-98, ene.-mar. 2012. ^btab, ^bgraf. Resumen: La prueba molecular Genotype MTBDRplus, es un método que permite identificar las mutaciones más frecuentes asociadas con la resistencia a las drogas antituberculosas de primera línea: isoniacida (INH) y rifampicina (RIF). El objetivo de este estudio fue evaluar el desempeño de la prueba molecular con cultivos y muestras de esputo con baciloscopía positiva. Se evaluó 95 cultivos y 100 esputos con perfiles de resistencia previamente determinados por el método de referencia “proporciones agar en placa” (APP). La prueba molecular a partir de cultivos mostró una sensibilidad de 100 por ciento;97,5 por ciento y 96,9 por ciento para RIF, INH y multidrogorresistente (MDR) respectivamente; mientras que para esputo la sensibilidadfue de 95,7 por ciento; 96,8 por ciento y 95,2 por ciento para RIF, INH y MDR respectivamente. Se concluye que Genotype MTBDRplus es una herramienta muy útil para la detección rápida de la resistencia a INH y RIF simultáneamente (MDR) en un máximo de72 h a partir de esputo o de cultivo(AU)^ies. Descriptores: Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos Técnicas de Diagnóstico Molecular Mutación Isoniacida Rifampin Validez de las Pruebas - Perú  Epidemiología Descriptiva  Epidemiología Experimental Límites: Humanos Medio Electrónico: http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/artrevista/pdf/rpmesp2012.v29.n1.a14.pdf / es Localización: PE14.1

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Id: 8015 Autor: Ascencios, L; Shin, SS; Han, LL; Llanos, F; Stowell, M; Sloutsky, A. Título: Validación de un método rápido para la detección de resistencia de M. tuberculosis a isoniazida y rifampicina en Lima, Perú^ies / Validation of a rapid method for detection of resistance of M. tuberculosis to isoniazid and rifampin in Lima, Peru Fuente: Bol. Inst. Nac. Salud (Perú);12(1/2):12-14, ene.-feb. 2006. ^bgraf. Descriptores: Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos Estudios de Validación como Asunto Isoniacida Rifampin Medio Electrónico: http://www.ins.gob.pe/RepositorioAPS/0/0/par/BOLINS_20/Boletin_Enero-Febrero2006.pdf / es Localización: PE14.1

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Id: 4337 Autor: Agapito, Juan; Neyra, Victor; Castro, Juan; Accinelli, Roberto; Rodríguez, Isaías; Espinoza, José R.. Título: Caracterización de las mutaciones en el gen rpoß asociadas a la resistencia a rifampicina en pacientes con tuberculosis pulmonar / Description of gene rpoß mutations associated with rifampicin resistance in patients with pulmonary tuberculosis Resumen: Antecedentes: la resistencia a rifampicina en M. tuberculosis involucra mutaciones en el gen rpoß que codifica a la subunidad ß de la ARN polimerasa. Objetivo: Identificar las mutaciones del gen rpoß, en cepas de M. tuberculosis asosciadas con resistencia a rifampicina aisladas de la Subregión de Salud Lima Norte, Perú. Materiales y métodos: Se cultivó en Lowestein - Jenseen 73 muestras de esputo de pacientes con tuberculosis pulmonar. A 62, con más de 10 colonias por tubo, se les comprobó susceptibilidad a isoniazida, rifampicina, estreptomicina y etambutol. Se realizó la extracción de ADN por PCR, clonación en el vector pGEM-T, transformación, selección de clonas recombinantes y secuenciamiento del ADN plasmídico para la determinación de los polimorfismos del gen rpoß. Resultados: 52 (83,9 por ciento) cepas fueron resistentes a rifampicina (Rif) y 10 (16,1 por ciento) susceptibles (Rif). Se encontró alteraciones en el gen rpoß en 51 de 52 cepas Rif. Se identificaron 20 mutaciones. Las mutaciones más frecuentes fueron encontradas en los codones Ser-531 (62,7 por ciento), His-526 (15,7 por ciento), Asp-516 (11,8 por ciento) y Gln-513 (5,9 por ciento). No se observó mutación alguna en las 10 cepas Rif. 94,2 por ciento de nuestras cepas Rif fueron también resistentes a isoniazida. Conclusiones: Se encontraron mutaciones en el gen rpoß de casi todas las cepas Rif; asimismo, casi todas las cepas Rif fueron también resistentes a isoniazida. Descriptores: MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS/genética MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS/efectos de drogas TUBERCULOSIS RESISTENTE A MULTIDROGAS RIFAMPIN/uso diagnóstico PERU Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a03v19n3.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;19(3):117-123, jul.-set. 2002

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Id: 4315 Autor: Calderón, Roger; Asencios, Luis; Quispe, Neyda; Custodio, Walter; Montoya, Ysabel. Título: Detección rápida de resistencia a drogas en Mycobacterium tuberculosis mediante PCR-SSCP y PCR-heteroduplex / Quick detection of Mycobacterium tuberculosis drug resistance using PCR-SSCP and PCR-heteroduplex Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;20(2):65-71, abr.-jun. 2003. ilus, tab. Resumen: Objetivo: Detectar tempranamente la susceptibilidad a las drogas antituberculosas rifampicina e isoniacida mediante PCR y electroforesis conformacional. Materiales y métodos: Se implementaron dos ensayos de amplificación de los genes rpoB y katG y mediante Heteroduplex y SSCP se determino la susceptibilidad antituberculosa de 31 muestras clínicas procedentes de pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar baciloscopia positiva. La caracterización fenotípica de la susceptibilidad, se realizó empleando el método de las proporciones. Resultados: Los ensayos de PCR detectaron hasta 2,5 pg de ADN genómico de M. tuberculosis; no amplificando ADN de otras micobacterias y bacterias comunes de la flora bucal. Se encontró una concordancia general entre la detección molecular y convencional de la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida de 96.7 por ciento y 83,9 por ciento (p<0,05), respectivamente. Sin embargo sólo en pacientes con antecedente de tratamiento se presentó una concordancia del 100 por ciento y 90,9 por ciento (p<0,05) para rifampicina e isoniacida, respectivamente. Además, este sistema de detección de resistencia puede emitir resultados 48 horas después de la recepción de la muestra clínica. Conclusiones: Estos sistemas se presentan como una excelente alternativa para la identificación temprana de pacientes infectados con bacilos de M. tuberculosis drogoresistentes. Potencialmente se podrán dirigir óptimos y oportunos esquemas terapéuticos que contribuiran con el control y prevención de la transmisión de cepas multidrogo-resistentes que afectan en gran medidad a la salud pública d nuestro país. Descriptores: REACCION EN CADENA POR POLIMERASA POLIMORFISMO CONFORMACIONAL RETORCIDO-SIMPLE TUBERCULOSIS RIFAMPIN ISONIACIDA Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2003/a02v20n2.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;20(2):65-71, abr.-jun. 2003

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